Bioendo™ rFC 엔도톡신 시험 키트
Recombinant Factor C Fluorometric Assay
유전자 재조합 기법으로 발현한 재조합 인자 C(rFC)가 엔도톡신과 결합하여 활성화되면 형광 기질을 촉매하여 형광 신호를 생성합니다. 380 nm 여기 / 440 nm 방출에서 측정하는 정량 시험 방식이며, β-glucan 간섭 없음 · 로트간 편차 최소 · 투구게 자원 보호가 핵심 강점입니다.
제품 상세 정보
재조합 인자 C(rFC) 형광 분석 방식 개요
전통 LAL 시약은 인자 C · B · 프로효소가 순차 활성화되는 캐스케이드 반응을 사용합니다. rFC는 이 중 인자 C만 유전자 재조합으로 발현하여 진핵 세포에서 대량 생산합니다. 엔도톡신이 rFC와 결합하면 비활성 proteasogen이 활성 protease로 전환되며, 이 protease가 형광 기질(fluorogenic substrate)을 촉매하여 형광 신호를 생성합니다.
형광 신호 강도는 엔도톡신 농도에 비례하므로 정량 분석이 가능하며, 여기 380 nm / 방출 440 nm 필터가 장착된 형광 마이크로플레이트 리더가 필요합니다.
rFC 주요 강점 (BIOENDO 원문)
- 신속 반응 — 30 – 60분 검출
- 엔도톡신 특이성 — β-glucan 간섭 없음 (Factor G pathway 우회 방지)
- 고감도 — 최소 검출 0.005 EU/mL
- 로트 재현성 — 재조합 발현으로 편차 최소
- 동결건조 형태 — 보관·운반 용이
- 자동화 — one-step 자동 검출·분석
RFC96TS 시약 구성 (BIOENDO 실측 · 96 tests)
| 시약 | 수량 | 비고 |
|---|---|---|
| Recombinant Factor C | 2 vials × 2.5 mL | 재조합 인자 C |
| Reconstitution Buffer | 2 vials × 3.0 mL | 재구성 완충액 |
| Control Standard Endotoxin (CSE10V) | 2 vials | 표준곡선 작성 |
| Water for BET (TRW50) | 1 vial × 50 mL | 희석용 |
| Endotoxin-free Black 8-well Strip | 15 strips | 형광 측정 전용 검정 microplate |
| Strip Bracket | 1 개 | Strip 고정 브래킷 |
필요 장비: 형광 마이크로플레이트 리더 (excitation 380 nm / emission 440 nm 필터 필수)
rFC 3종 라인업 (BIOENDO 실측)
| 코드 | 구성 | 감도 |
|---|---|---|
| RFC96TS | 96 tests · 전 구성 포함 | 0.005 – 5 EU/mL |
| RFC96T | 96 tests · 전 구성 포함 | 0.01 – 10 EU/mL |
| MPF96 | Endotoxin-free black 8-well plate strip | rFC 전용 부속품 (별매) |
선택 가이드
- 초저감도 요구 (WFI · 세포치료 원자재) → RFC96TS
- 범위가 넓은 시료 (제조 공정 모니터링) → RFC96T
- strip 추가 발주 → MPF96
투구게 자원 보호 · 지속가능성
전통 LAL/TAL 시약은 투구게(Limulus/Tachypleus) 아메보사이트에서 추출합니다. 전 세계 투구게 개체 수 감소로 지속가능성 우려가 커지는 가운데, rFC는 유전자 재조합으로 발현하므로 동물 유래 원료 사용 없음 → 투구게 자원 보호.
국제 규정 흐름
- 2012 · EP 2.6.32 — 유럽약전, rFC 대체 시험법으로 최초 인정
- 2020 · USP General Chapter <1085> — rFC 참고 표준 발간
- 2024 · USP <86> — Bacterial Endotoxins Test Using Recombinant Reagents 공식 발효
글로벌 제약사 전환
Eli Lilly · Sanofi · Roche 등 글로벌 제약사가 이미 rFC 대체 검사 도입 · 밸리데이션 완료. 국내 바이오시밀러 · 항체치료제 개발사도 USP <86> 발효 이후 rFC 전환 검토가 확산되고 있습니다.
시험 표준 절차
- 사전 준비: 시약 실온 평형화 · 형광 리더 380/440 nm 필터 확인 · 37°C incubation ON.
- 표준곡선: CSE를 LAL 시약수(LRW)로 단계 희석 (0.005 · 0.05 · 0.5 · 5 EU/mL 4점).
- rFC 재구성: rFC vial에 Reconstitution Buffer를 지정 부피로 넣고 부드럽게 혼합.
- 플레이트 분주: Endotoxin-free black 8-well strip에 표준·검체 각 100 μL, rFC 100 μL 분주.
- Fluorescence Read: 380 nm 여기 / 440 nm 방출 · 30 – 60분 반응 후 판독.
- 분석: 형광값 → log(EU/mL) 직선 회귀 → 검체 EU/mL 정량.
- 합격 판정: 상관계수 |r| ≥ 0.980, PPC 회수율 50 – 200%.
CoA · MSDS · 시험방법서
BIOENDO CoA · MSDS · 시험방법서를 로트 단위로 제공합니다. USP <86> 대체 검사 밸리데이션 지원 자료도 별도 제공 가능합니다.
- Certificate of Analysis (로트별 실측 감도)
- Material Safety Data Sheet
- Instruction for Use
- USP <86> 대체 검사 밸리데이션 지원 패키지 (별도 요청)
📥 문서 요청 →
rFC 시약 견적 · 평가용 요청
보유 형광 마이크로플레이트 리더 모델과 USP <86> 밸리데이션 계획을 알려주시면, 사용 방법 안내와 함께 평가용 시약을 보내드립니다.